Les bases de la biologie cellulaire et de la culture cellulaire

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•   Connaissances scientifiques

Objectifs

• Appréhender l'ensemble des concepts théoriques nécessaires à la réalisation de la culture cellulaire.
• Comprendre l'ensemble des paramètres qui influencent la culture cellulaire afin de répondre de manière adéquate aux différents éléments qui peuvent influencer le rendement de croissance des cultures.
• Apprendre les règles de bonne pratique en laboratoire et maîtriser les risques liés à la contamination de cultures cellulaires afin de garantir la sécurité des personnels et la bonne conduite des expérimentations.

NB : Le contexte sanitaire nous contraint à limiter le nombre de participants aux sessions de formation. Dans l’éventualité où  la formation serait proposée à distance, vous serez immédiatement contacté.e. 

Public

Personnels scientifiques et techniques voulant s'initier à la culture cellulaire.

Programme

LA CELLULE

1/ Fonction/Utilisation/Applications

• La cellule, une unité de vie
• Les énoncés de la théorie cellulaire

2/ La théorie cellulaire

3/ caractéristiques propres aux organismes pluricellulaires

• Cohésion spécialisation
• Organisation hiérarchique
• Coordination des activités

4/ Structure de la cellule eucaryote

• Membrane plasmique Noyau Cytosquelette Reticulum endoplasmique Appareil de Golgi Mitochondrie

5/ Propriétés des membranes

• Endocytose Adhérence Communication

6/ Prolifération, différenciation et mort cellulaire

LA CULTURE CELLULAIRE

1/ Introduction/Définitions/Historique Les modalités d’obtention des cellules

• A partir de cellules en suspension
• A partir d’explants entiers
• A partir d’explants dissociés

2/ Les systèmes cellulaires

• Les cultures primaires
• Les lignes cellulaires
• Les hybridomes
• Les cellules souches
• Les banques de cellules

3/ Les système de culture

• La culture d’organes
• La culture d’explants
• La culture de cellules
• La culture organotypique

4/ La culture de cellules

• La culture de cellules en suspension
• La culture de cellules adhérentes
• La culture en monocouche
• La culture en trois-dimensions

5/ La prolifération cellulaire et le passage

• La courbe de croissance des cellules
• Le repiquage (ou passage) des cellules
• Le temps de doublement
• La sénescence cellulaire

6/ Les conditions de culture

• Le ph
• La température
• L’osmolarité
• L’oxygène

7/ les milieux de culture

• Les différents types de milieu de culture
• Les solutions salines équilibrées
• Les constituants du milieu de culture
• Les antibiotiques
• Le sérum
• Les milieux définis sans sérum
• Le renouvellement du milieu de culture

8/ La conservation des cellules

• La congélation
• La décongélation
• L’organisation des stocks cellulaires

9/ Le clonage et la séparation des cellules

• Clonage
• Définition
• Clonage par dilution de cellules adhérentes
• Clonage par dilution limite
• Clonage de cellules en suspension
• Avantages & limites
• Techniques de séparation de cellules
• Exemple de séparation cellulaire

10/ La transformation cellulaire

• Définition
• Le contrôle de la sénescence – L’immortalisation – La Télomérase
• La transformation cellulaire
• La progression tumorale mimée par la transformation in vitro

11/ Les bonnes pratiques de culture cellulaire

• Les contaminations et la prévention
• L’environnement de culture
• Les bonnes pratiques de laboratoire

12/ La culture à échelle industrielle

• Introduction
• Le scale-up en suspension
• Le scale-up en monocouche
• Les contrôles