Microscopie électronique en transmission (MET) : de la cellule à l'organisme [ ANNULEE ]

• Action régionale
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•   Techniques spécifiques
•    Claire BOULOGNE , Cynthia GILLET , Malika OULD ALI , Ana-Andreea ARTENI

Objectifs

• Acquérir les principes et les contraintes de formation d’une image en microscopie électronique
• Appréhender les techniques de préparation d’échantillon adaptées à son échantillon
• Initiation aux approches 3D pour la biologie structurale et la biologie cellulaire

Public

Chercheurs, ingénieurs, doctorants

Programme

1/ La microscopie électronique en biologie

• Les principes de l’imagerie électronique
• Les étapes de préparation d’échantillon pour les cellules.
• Les étapes de réalisation de coupes
• Les techniques de préparation pour particules isolées
• Les contraintes d’observation en cryo-MET

Atelier 1 : Fixation de cellules adhérentes

Atelier 2 : Ultramicrotomie et observation de coupes au MET

Atelier 3 : Observation de particules isolées en cryo-MET

2/ La 3D en MET

• Les différentes approches de 3D en MET
• Le choix de la méthode la plus adaptée à sa question biologique

Atelier 4 : Réalisation d’un tutoriel de relion et reconstruction 3D de particules virales

Atelier 6 : Réalisation d’un tomogramme et reconstruction 3D

Méthodes pédagogiques

Alternance de théorie et de travaux pratiques. Travail en sous-groupes.

Matériel : Plateforme d’imagerie et de cryo-MET du laboratoire I2BC de Gif